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培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢可能原因及解決方法
培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢可能原因及解決方法:
可能原因:
1、由于更換不同培養(yǎng)液或血清;
2、培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞;
3、培養(yǎng)物中有少量細(xì) 菌或 真 菌污染;
4、試劑保存不當(dāng);
5、接種細(xì)胞起始濃度太低;
6、細(xì)胞已老化;
7、支原體污染 。
解決方法:
1、比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;
2、換入新鮮配置培養(yǎng)液,或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長(zhǎng)因子;
3、用無(wú)抗生 素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物;
4、血清需保存在-10到-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內(nèi)用完;
5、增加接種細(xì)胞起始濃度;
6、換用新的保種細(xì)胞;
7、分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。